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普通PCR和熒光定量PCR區(qū)別

日期:2025-01-17 21:49
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摘要: 一、原理不同: 熒光定量pcr實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與dna結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光; 普通pcr通過(guò)檢測(cè)插入dna中核算染料的量來(lái)測(cè)定pcr zui終產(chǎn)物量,一般是紫外光。 二、反應(yīng)要求: 熒光定量對(duì)擴(kuò)增片段有較高的要求,一般為100-300bp; 普通定量可以擴(kuò)增長(zhǎng)點(diǎn)的片段,如果不需要檢測(cè)產(chǎn)物分子量大小, 熒光定量可以不進(jìn)行電泳就對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定量分析,普通pcr必須電泳。 結(jié)果:熒光定量可以實(shí)現(xiàn)精que定量,普通pcr則不行。熒光定量體現(xiàn)可以看到整個(gè)擴(kuò)增過(guò)程,可以看到擴(kuò)增效率,溶解溫度,直接得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)等,這些...

一、原理不同:

熒光定量pcr實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與dna結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光;

普通pcr通過(guò)檢測(cè)插入dna中核算染料的量來(lái)測(cè)定pcr zui終產(chǎn)物量,一般是紫外光。

二、反應(yīng)要求:

熒光定量對(duì)擴(kuò)增片段有較高的要求,一般為100-300bp;

普通定量可以擴(kuò)增長(zhǎng)點(diǎn)的片段,如果不需要檢測(cè)產(chǎn)物分子量大小, 熒光定量可以不進(jìn)行電泳就對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定量分析,普通pcr必須電泳。

結(jié)果:熒光定量可以實(shí)現(xiàn)精que定量,普通pcr則不行。熒光定量體現(xiàn)可以看到整個(gè)擴(kuò)增過(guò)程,可以看到擴(kuò)增效率,溶解溫度,直接得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)等,這些是普通pcr無(wú)法實(shí)現(xiàn)的。