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生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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qPCR?試驗無Ct值出現(xiàn)原因及解決方法
日期：2025-01-17 21:49
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摘要：
qPCR試驗無Ct值出現(xiàn)原因及解決方法：
1、檢測熒光信號的步驟有誤：
一般染料法采用72℃延伸時采集，探針法則一般在退火結(jié)束時或延伸結(jié)束采集信號。
2、引物或探針降解：
可通過PAGE電泳檢測其完整性。
3、模板量不足：
對未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的zui高濃度做起。
4、模板降解：
避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。
5、反應(yīng)循環(huán)數(shù)不夠：
一般都要在35個循環(huán)以上，可根據(jù)實驗情況增加循環(huán)，但高于45個循環(huán)會增加過多的背景信號。
qPCR試驗無Ct值出現(xiàn)原因及解決方法：
一般染料法采用72℃延伸時采集，探針法則一般在退火結(jié)束時或延伸結(jié)束采集信號。
2、引物或探針降解：
可通過PAGE電泳檢測其完整性。
3、模板量不足：
對未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的zui高濃度做起。
4、模板降解：
避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。
5、反應(yīng)循環(huán)數(shù)不夠：
一般都要在35個循環(huán)以上，可根據(jù)實驗情況增加循環(huán)，但高于45個循環(huán)會增加過多的背景信號。