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PCR反應(yīng)基本步驟
日期：2025-01-17 17:40
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摘要：
PCR反應(yīng)基本步驟：
變性：根據(jù)DNA高溫變性的原理，將反應(yīng)體系溫度升至變性溫度（高于模板熔點，約95℃），使目的DNA雙鏈裂解成PCR模板（單鏈）。[95℃，30s]
退火：將反應(yīng)體系溫度驟降至退火溫度（低于引物熔點約55℃），是PCR引物與PCR模板3’端雜交，稱為退火。[55~65℃，30s]
延伸：將反應(yīng)體系溫度升至延伸溫度（約72℃），DNA聚合酶按照堿基配對原則在引物3’端以5’→3’方向催化合成PCR模板新的互補鏈，使目的DNA拷貝數(shù)增加1倍。[72℃，30~60s]
PCR反應(yīng)基本步驟：
變性：根據(jù)DNA高溫變性的原理，將反應(yīng)體系溫度升至變性溫度（高于模板熔點，約95℃），使目的DNA雙鏈裂解成PCR模板（單鏈）。[95℃，30s]
退火：將反應(yīng)體系溫度驟降至退火溫度（低于引物熔點約55℃），是PCR引物與PCR模板3’端雜交，稱為退火。[55~65℃，30s]
延伸：將反應(yīng)體系溫度升至延伸溫度（約72℃），DNA聚合酶按照堿基配對原則在引物3’端以5’→3’方向催化合成PCR模板新的互補鏈，使目的DNA拷貝數(shù)增加1倍。[72℃，30~60s]