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PCR擴增不出情況解析
日期：2025-01-17 17:29
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摘要：
PCR擴增不出與引物關(guān)聯(lián)：
當(dāng)今發(fā)展出各色各樣的PCR擴增技術(shù)，各色各樣的高溫聚合酶，就是來解決PCR擴增中遇到的擴不出、擴增效率低的問題。如巢式PCR就是擴增那些拷貝數(shù)很低的基因片段。 有些重復(fù)片段的擴增, GC含量高的片段，非要采用特殊擴增手段才能擴增出了。
引物擴增不出，主要是下列兩種情況比較常見：
1、 RT-PCR。 請注意，很多基因通過常規(guī)RT -PCR方法是很難擴增出來的。 RT- PCR成功的關(guān)鍵在于RT的反應(yīng)的RNA質(zhì)量和目標(biāo)基因在特定組織和細(xì)胞中含量。
2、從基因組中擴增。 一般情況下，基...
PCR擴增不出與引物關(guān)聯(lián)：
當(dāng)今發(fā)展出各色各樣的PCR擴增技術(shù)，各色各樣的高溫聚合酶，就是來解決PCR擴增中遇到的擴不出、擴增效率低的問題。如巢式PCR就是擴增那些拷貝數(shù)很低的基因片段。 有些重復(fù)片段的擴增, GC含量高的片段，非要采用特殊擴增手段才能擴增出了。
引物擴增不出，主要是下列兩種情況比較常見：
1、 RT-PCR。 請注意，很多基因通過常規(guī)RT -PCR方法是很難擴增出來的。 RT- PCR成功的關(guān)鍵在于RT的反應(yīng)的RNA質(zhì)量和目標(biāo)基因在特定組織和細(xì)胞中含量。
2、從基因組中擴增。 一般情況下，基因在基因組中都是單拷貝，基因組作為模板需要嚴(yán)格控制用量?；蚪MDNA過高，會影響反應(yīng)體系中的Mg和pH