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產生組織切片非特異性染色
日期:2025-01-17 21:46
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摘要:
產生組織切片非特異性染色
1、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條;
2、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看;
3、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;
4、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免 疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;
5、DAB孵育時間過長或濃度過高...
產生組織切片非特異性染色
1、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條;
2、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看;
3、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;
4、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免 疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;
5、DAB孵育時間過長或濃度過高;
6、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要;
7、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。