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ELISA實(shí)驗(yàn)競爭法簡介
日期:2025-01-17 21:07
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摘要:
競爭法(Competitive ELISA)
原理:樣本中的抗原及預(yù)包被的酶標(biāo)抗原,競爭性地與固相抗體相結(jié)合。樣本中的抗原含量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原就越少,終顯色也越淺。需要注意的是,顯色結(jié)果與待檢抗原(或抗體)的量成反比。
預(yù)先將抗原包被在固相載體上,并加入酶標(biāo)記的特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),加入待檢抗原(或抗體),如果待檢物是抗原,則待檢抗原與預(yù)先包被在固相載體上的抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體;如果待檢測物是抗體,則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競爭結(jié)合包被在固相載體上的抗原。通過洗滌洗掉被競爭結(jié)合的...
競爭法(Competitive ELISA)
原理:樣本中的抗原及預(yù)包被的酶標(biāo)抗原,競爭性地與固相抗體相結(jié)合。樣本中的抗原含量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原就越少,終顯色也越淺。需要注意的是,顯色結(jié)果與待檢抗原(或抗體)的量成反比。
預(yù)先將抗原包被在固相載體上,并加入酶標(biāo)記的特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),加入待檢抗原(或抗體),如果待檢物是抗原,則待檢抗原與預(yù)先包被在固相載體上的抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體;如果待檢測物是抗體,則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競爭結(jié)合包被在固相載體上的抗原。通過洗滌洗掉被競爭結(jié)合的酶標(biāo)抗體,后加底物顯色。
競爭法顯色結(jié)果與待檢抗原(或抗體)的量成反比,且適用于測定只有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的小分子物質(zhì)。
優(yōu)點(diǎn):可檢測不純的樣品,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性高。
缺點(diǎn):存在整體敏感性和專一性較差的問題。