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PCR基本成分包含什么

日期:2025-01-17 21:48
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摘要: 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Polymerase chain raction ,PCR)是一種在體外擴(kuò)增特定DNA片段的方法,可用很短時(shí)間使目的基因或某一片段擴(kuò)增十萬(wàn)乃至幾百萬(wàn)倍。 1、模板DNA 來(lái)源比較廣,幾乎所有形式的DNA和RNA都能作為PCR反應(yīng)的模板。 2、緩沖液 用于維持DNA聚合酶的活性和穩(wěn)定性。 3、dNTP 四種dNTP是PCR原料,其比例和濃度與PCR密切相關(guān)。 4、TaqDNA聚合酶簡(jiǎn)稱Taq酶 在1969年在美國(guó)黃石國(guó)家公園溫泉中發(fā)現(xiàn)。Taq酶具有良好的熱穩(wěn)定性,在92.5℃、95℃和97.5℃的半衰...

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Polymerase chain raction ,PCR)是一種在體外擴(kuò)增特定DNA片段的方法,可用很短時(shí)間使目的基因或某一片段擴(kuò)增十萬(wàn)乃至幾百萬(wàn)倍。

1、模板DNA

來(lái)源比較廣,幾乎所有形式的DNA和RNA都能作為PCR反應(yīng)的模板。

2、緩沖液

用于維持DNA聚合酶的活性和穩(wěn)定性。

3、dNTP

四種dNTP是PCR原料,其比例和濃度與PCR密切相關(guān)。

4、TaqDNA聚合酶簡(jiǎn)稱Taq酶

在1969年在美國(guó)黃石國(guó)家公園溫泉中發(fā)現(xiàn)。Taq酶具有良好的熱穩(wěn)定性,在92.5℃、95℃和97.5℃的半衰期為120 min、40 min、5min;

5、其它成分

Mg2 能活化DNA聚合酶;二甲基亞砜有利于DNA的變性;TMAC可去除非特異擴(kuò)增,促進(jìn)PCR;甘油有利于DNA復(fù)性,不過(guò)并不是對(duì)所有的PCR都有利。