實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。 

C1q/TNF相關蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)ELISA試劑盒2,4-二芐氧基嘧啶-5-酸 95% 2,6-二氯-4-三氟 98%二二(>98%，BR)

B因子(BF)ELISA試劑盒3-二甲氨基苯酸鹽酸鹽 98% 2-氨基-5-氯三氟甲苯 97%亞硝酸二環(huán)己(>98%，BR)

B受體相關蛋白31(BCAP31)ELISA試劑盒3-乙氧羰基苯酸 97%3-氨基-4-氯三氟甲苯 97%馬來酸二乙酯(>98%，BR)

B受體(BCR)ELISA試劑盒2-乙氧基-1-萘酸 98%3-氯三氟甲苯 98%硫酸乙酯(>98%，BR)

B生長因子(BCGF)ELISA試劑盒5-甲基呋喃-2-酸 97%2-氯三氟甲苯 99%二氫松弛素(>98%，BR)

B瘤因子6(Bcl6)ELISA試劑盒5-基-2-噻吩酸  97%4-氯-3-硝基三氟 98%二異辛(>98%，BR)

B瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒6-氟吡啶-3-酸 96%5-氯-2-硝基三氟甲苯 99%碳酸二甲酯(>99%,BR)

B瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒2-氟吡啶-3-酸 97%4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯 97%間苯二甲酸二甲酯(>99%,BR)

B瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒2-氟吡啶-4-酸 95%2-氯-3,5-二硝基三氟甲苯 99%馬來酸二甲酯(>98%，BR)

B連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒2-氟-4-甲基吡啶-5-酸 98%2,4-二氯三氟甲苯 98%草酸二甲酯(>98%，BR)

B活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒6-異氧基吡啶-3-酸頻哪酯 97% 3,5-二硝基三氟甲苯 99%丁二酸二甲酯(>99%,BR)

B活化因子(BAFF)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶基-3-酸 97%2,4-二氯-3,5-二硝基三氟甲苯 97%二甲酮鈉鹽(>97%,BR)

B分化因子(BCDF)ELISA試劑盒4-甲酯基苯酸 97%3-三氟酚 99%N,N-二異基乙(>98%，BR)

Bκ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒6-甲氧基吡啶-3-酸 98%3-硝基三氟甲苯 97%二苯烷(>98%，BR)

B-趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒4-甲氧基苯基酸 97%(三氟甲氧基)苯 99%二苯甲(>98% (HPLC),BR)

B抗原(CD20)ELISA試劑盒3-甲氧羰基苯酸頻哪酯 97%3,4,5-三氯三氟甲苯 98%直接藍71(≥50%,BR)
大鼠牙周膜干細胞黑曲霉

種屬: Aspergillus│niger

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 釀造白酒、酒精的糖化用菌。

培養(yǎng)基: CM0015

生長條件: 28℃

乳酸鏈球菌

種屬: Lactococcus│lactis subsp. lactis

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: yes

培養(yǎng)基: 0006

生長條件: 30℃

存儲條件: -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；定期移植法
培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。