公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒次硝酸鉍 AR,99.5%1H-咪唑-4-甲酸 98%葡萄糖-6-磷酸脫氫酶

Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)ELISA試劑盒硝酸鉍 CP,99.0%三氟磺酸酐 98%戊二酸(>98%,BR)

Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒次碳酸鉍 AR,90.0%3-溴 98%戊二酸酐(>96%,BR)

Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒氯化鈣,二水 AR苯并-15-冠-5 98%三醋酸甘油酯(>98%,BR)

Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)ELISA試劑盒無水氯化鈣 AR,96.0%鄰苯二酚-O，O′-二乙酸 97%甘氨酸鈉(>98%,BR)

Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒無水氯化鈣 CP,96.0%1-(3-氨基基)吡咯烷 97%乙酸(>98%,BR)

Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒無水氯化鈣 ACS2-苯氧基溴乙烷 98%硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)

Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6/MUC1)ELISA試劑盒無水氯化鈣 99.99% metals basis氯代異丁烷 98%氯化金

Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA試劑盒檸檬酸,一水 99.995% metals basis氯代正烷 99%石墨粉(>99%,BR)

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒尼泊金乙酯 AR,99%氯代正烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)硝酸胍(分子生物學(xué)級)

Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 AR氯代仲丁烷 99%己二(>98%，BR)

Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 99.99% metals basis1-氯代正戊烷  Standard for GC, ≥99.5% (GC)六甲基磷酰三(>98%,BR)

Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 ACS, ≥99.0%1-氯代正戊烷 99%還原茚三酮二水合物(>98%,BR)

Ⅰ型膠原羧基端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 for plant cell culture, ≥99%環(huán)戊乙酸 98%氫(>40%,BC)

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒檸檬酸 CP,99.0%1,4-二氯丁烷 98%中粘度羥基纖維素

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒鈉石灰 醫(yī)用級，紅色2-羥基-4-甲氧基苯甲 98%3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)
大鼠主動脈弓內(nèi)皮細(xì)胞鏈霉菌

種屬: Streptomyces│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0012

生長條件: 28℃

球形芽孢桿菌

種屬: Bacillus│sphaericus

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 殺蚊蟲高毒菌株

培養(yǎng)基: 266

生長條件: 30℃