商品屬性：
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貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1016-100Tx25μl |
100Tx25μl |
HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基礎(chǔ)凍干球) |
儲存條件：
HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基礎(chǔ)凍干球)儲存：-20℃干燥密封保存 24 個月；室溫（25℃）密封保存 12 個月。避免受潮。
產(chǎn)品介紹：
該制品為全體系凍干微球制品，包含了 HotStartBst4.2 DNA/RNA 聚合酶、Helicaser、dNTP、Mg2+、反應緩沖鹽、凍干賦形劑，單球擴增體系為 25ul。
Bst4.2 具有以下性能：
（1）Bst 4.2 全系包含熱啟動Aptamer，該配體確保酶在<30℃時，酶活封閉效率>95%,在>60℃時 1min 內(nèi)完全釋放酶活。該特性利于室溫建立反應體系，并大幅降低了低溫條件下的非特異擴增；
（2）反應溫度提升到 70℃，大幅降低引物 Dimer 的形成，提高擴增特異性，并使得粗樣品核酸釋放更加充分；
（3）全系包含 Helicaser，因此，允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進行 LAMP 擴增（easy LAMP），并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增，并使得擴增均一性大幅提升。
本品為多用途的試劑，適用于 LAMP 進行 MolecularBeacon 探針、DP-LAMP 探針、試紙條等檢測。
特殊說明：
（1） Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的推薦反應溫度為 65-70℃，*佳反應溫度為 70℃。因此其可完全替代 的 Bst4.0 系列，用于標準 LAMP 的擴增。
（2） 由于 Helicaser 的反應溫度為 70℃，因此在進行 eLAMP 擴增時，反應溫度為 70℃。
（3） 制品中包含高濃度的鹽組分，使用時做好個人防護，防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入，一旦接觸或吸入，請用大量的清水沖洗。
（4）防止氣溶膠污染，盡可能進行分區(qū)操作。
1. 標準 LAMP 和 eLAMP 擴增的區(qū)別
本試劑既可以用于標準 LAMP 擴增，也可以用于 eLAMP擴增。
1.1 10x 標準 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意：eLAMP（easy LAMP）為去除 F3/B3 引物的方法，為 Bst4.2系列專用的使用策略，對于大多數(shù)引物組，在 Helicaser 的加持下，擴增速度幾乎不受影響。如引物擴增效率低，可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16uM。1.3 擴增溫度不同標準 LAMP 擴增 eLAMP 擴增65-70°C 均可 70°C 反應
2. 配制 LAMP 反應體系HotStart Bst 4.2 Basic Bead 1 個10x Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
反應體系配好后，置于 65-70°C 反應 20~30min。
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