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細(xì)胞簡介:
人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分離自肺組織;肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細(xì)胞,又稱I型肺泡細(xì)胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細(xì)胞,又稱Ⅱ型肺泡細(xì)胞,分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰卵磷脂),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細(xì)胞位于Ⅰ型肺泡細(xì)胞之間,數(shù)量較Ⅰ型肺泡細(xì)胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細(xì)胞小。細(xì)胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細(xì)胞核圓形,胞質(zhì)著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細(xì)胞游離而有少量微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體,有較發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu),稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰卵磷脂為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(zhì)(surfactant)。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質(zhì)密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴(kuò)張,表面活性物質(zhì)密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細(xì)胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細(xì)胞的潛能,故具有修復(fù)受損傷上皮的作用。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 |
英文名稱 |
Human Alveolar Type II Epithelial Cells |
組織來源 |
肺組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 |
A01X1254 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁 |
方法簡介:
實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞采用彈性蛋白酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞經(jīng)SP-C熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號 CM-H209
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
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① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時,細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。