(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細胞系的步,是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
商品屬性:
組織來源 |
肝臟組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
細胞簡介:
大鼠肝星形細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、維生素A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態(tài),當肝臟發(fā)生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚停せ畹?span lang="EN-US">HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結構的重建,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細胞外基質的主要來源,在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質細胞,約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構,還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調節(jié)。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肝星形細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠肝星狀細胞經(jīng)α-SMA、Desmin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
公司正在出售的產(chǎn)品:
MMP-8ELISAkit
大鼠1,25-二羥維生素D(3)24-羥化酶,線粒體(CYP24A1)elisa分析檢測試劑盒
mitochondrial(CYP24A1)ELISA kit
人分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)elisa分析檢測試劑盒
HumanSFRP5ELISAKit
小鼠補體成分4(C4)elisa檢測試劑盒
AEC顯色試劑盒
CASPASE-3蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
谷胱甘肽S-轉移酶(GST)測試盒
胰島素生長因子樣家族成員1抗體
IGFL1
17號染色體開放閱讀框104抗體
C17orf104
小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠分泌型卷曲相關蛋白1(SFRP1)elisa檢測試劑盒
前列D合成酶(prostaglandin D synthase)活性比色法定量檢測試劑盒
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)elisa分析檢測試劑盒
核仁源蛋白17抗體
PIH1D1
熱休克蛋白70樣蛋白1抗體
HSPA14
腱調蛋白抗體(軟骨調節(jié)素樣1蛋白) Anti-TNMD/tenomodulin
蛋白酶體PSMα1抗體 Anti-Proteasome 20S C2
多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體 Anti-PLAGL2
鞘磷脂合成酶2抗體 Anti-Sphingomyelin Synthase 2
PE-Cy7標記的羊抗雞IgG H&L
大鼠肝星狀細胞Arf6鳥苷酸酶活性分析試劑盒
小鼠δ樣蛋白1源物(δLK1)elisa檢測試劑盒
大鼠脂蛋白關聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)elisa檢測試劑盒
PP2A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。