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細胞簡介:
兔肺動脈平滑肌細胞分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。肺動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發(fā)展的重要病理學特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)展。肺動脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數(shù)重要動脈的靶細胞。肺動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
種屬 |
兔 |
|
組織來源 |
肺動脈 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 |
A01X2008 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁 |
方法簡介:
實驗室分離的兔肺動脈平滑肌細胞采用中性蛋白酶 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔肺動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肺動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行
c 細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時,細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長。
f 細胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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