(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細胞系的步,是一項基本技術(shù)。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性:
組織來源 |
主動脈組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細胞分類 |
豬原代細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
內(nèi)皮細胞樣 |
細胞簡介:
豬主動脈內(nèi)皮細胞分離自主動脈組織;主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈內(nèi)皮細胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細胞,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),當其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導致一些心血管的發(fā)生。因此,主動脈內(nèi)皮細胞已成為研究心血管發(fā)病機制及的工具。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。
方法簡介:
公司實驗室分離的豬主動脈內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的豬主動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
公司正在出售的產(chǎn)品:
β-EPELISAKit
六磷酸肌醇激酶3抗體
IHPK3/IP6 Kinase
1號染色體開放閱讀框138抗體
C1orf138
豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子 VEGF elisa檢測試劑盒
蘑菇β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑盒
小鼠C反應蛋白(CRP)elisa檢測試劑盒免費代測
MICAL樣蛋白1抗體
MICALL1/MIRab13
鴨瘟病毒DPV抗體
Duck plague virus
腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體 Anti-TNFRSF19/TROY
磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 Anti-phospho-RKIP (Ser153)
磷酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體 Anti-phospho-NFAT5 (Ser1197)
神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體 Anti-VANGL2
SBDN蛋白抗體
TRAPPC4
線粒體核糖體蛋白S16抗體
MRPS16
5-羥色胺受體2A抗體 Anti-5-HTR2A
視神經(jīng)相關(guān)蛋白1抗體 Anti-OPA1
橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體 Anti-Pinin
α微管蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶1抗體 Anti-α-TAT
PerCP標記小鼠IgM(型對照)
豬主動脈內(nèi)皮細胞大鼠促酰化蛋白(ASP)elisa分析檢測試劑盒
ASP ELISA Kit
人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)elisa分析檢測試劑盒
PYDELISAKit
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。