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細(xì)胞簡介：
脾是重要的器官，有造血、濾血、衰老血細(xì)胞及參與反應(yīng)等功能。也是細(xì)胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
種屬 |
大鼠 |
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組織來源 |
脾臟組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 |
A01X1689 |
細(xì)胞形態(tài) |
不規(guī)則細(xì)胞 |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實驗動物的正常脾臟組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31或CD34熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf原代 內(nèi)皮祖 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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血管內(nèi)皮生長因子D型抗體 Anti-VEGF-D
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG H&L
大鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞LSM4蛋白抗體
LSM4
細(xì)胞色素P450 A43抗體
CYP3A43
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時，細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。