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組織來源 |
增生性瘢痕組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞分類 |
人原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
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生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
成纖維樣細(xì)胞 |
細(xì)胞簡介：
增生性瘢痕由少量有組織的膠原纖維組成，缺乏粘液樣基質(zhì)。增生性瘢痕是深層真皮損傷的結(jié)果，尤其是創(chuàng)傷后形成的傷口和炎癥、纖維化階段延長的傷口。瘢痕大小于損傷范圍，而不累計(jì)周圍未受傷皮膚，能自行退化。
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來源于手術(shù)切除的增生性瘢痕組織。
2) 細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Anti-SIRT1
鳥嘌呤核苷酸交換因子抗體 Anti-RCBTB1/CLLD7
核仁蛋白C23抗體 Anti-Nucleolin/C23
信號通路Wnt5a抗體 Anti-WNT5A
轉(zhuǎn)錄起始因子RAP30抗體 GTF2F1
自噬相關(guān)蛋白8A抗體 APG8A
過氧化物酶體生成蛋白5相關(guān)蛋白抗體 PEX5L
核受體共激活劑1抗體 NCOA1/KAT13A
ND4L抗體 MTND4L
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 APNG/MPG
乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2抗體 PALB2
神經(jīng)叢蛋白B1抗體 Plexin B1
DEK癌基因結(jié)合蛋白 DEK
DNA修復(fù)蛋白GIYD2抗體 GIYD2
磷酸化蛋白激酶C theta抗體 phospho-PRKCQ (Thr538)
磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1/2（CD331/CD332）抗體 Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463/Tyr466)
胞外基質(zhì)蛋白3抗體 Matrilin 3
補(bǔ)體片段C3c抗體 Complement fragment 3c
線粒體釋放因子1樣蛋白抗體 MTRF1
鋅指蛋白139抗體 ZNF139/ZKSCAN1
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