(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性:
組織來源 |
腦動(dòng)脈組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞分類 |
鴨原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
鋪路石狀細(xì)胞 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦。大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細(xì)胞旁的通量;腦微血管的內(nèi)皮細(xì)胞間銜接得十分緊密,不象其他組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞那樣有較大的縫隙腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),從而產(chǎn)生 兩極分化的表現(xiàn)型。 與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,調(diào)控白
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 DELF原代 內(nèi)皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
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衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體 ITIH1
蛋白酶體組裝分子伴侶3抗體 PSMG3
凋亡相關(guān)蛋白4抗體 [KO驗(yàn)證抗體] PDCD4
FDXACB1蛋白抗體 FDXACB1
FITC標(biāo)記小鼠CD54/ICAM-1單克隆抗體 mouse CD54/ICAM-1/FITC
磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 PIK3R2
毛發(fā)角蛋白34抗體 KRT34
2型補(bǔ)體受體(CD21)抗體 CR2
6號(hào)染色體開放閱讀框182抗體 C6ORF182
基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體 MMP24
甲/2-(甲基氨基)-1-苯基-1-丙酮單克隆抗體 Methcathinone
Ran結(jié)合蛋白11抗體 IPO11
Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 ROCK2
絲氨酸羧肽酶1抗體 Serine carboxypeptidase 1
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-β抗體 GTF2A1 beta
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鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞磷酸化原基因蛋白18抗體 Anti-Phospho-Stathmin(Ser38)
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗猴IgM
Rabbit Anti-Monkey IgM / HRP
神經(jīng)叢蛋白A2抗體
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。