(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性:
組織來源 |
乳腺組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞分類 |
羊原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮樣 多角形細(xì)胞 |
細(xì)胞簡介:
乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。腺體由 15-20個腺葉組成,每一腺葉分成若干個腺小葉,每一腺小葉又由10-100個腺泡組成,這些腺泡緊密地排列在小乳管周圍,腺泡的開口與小乳管相連。
乳腺上皮細(xì)胞來源于乳腺小葉中。它們與腺體導(dǎo)管和脂肪組織一起在乳腺中形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。乳腺上皮細(xì)胞在人和動物體出生、發(fā)育和妊娠中均會受***調(diào)控而進(jìn)行一系列的增長、遷移和分化。水平失調(diào)、細(xì)胞外基質(zhì)的變化和其它的
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動物正常乳腺組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-8(CK-8)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
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視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體 Anti-TIG2
中心體相關(guān)蛋白激酶Nek2抗體 Anti-NEK2
鋅指蛋白749抗體 Anti-ZNF749
鉀離子通道KCNJ18抗體
KCNJ18
細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體
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環(huán)指蛋白167抗體
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驅(qū)動蛋白家族成員26B抗體
KIF26B
固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體 Anti-SCAP/SREBF chaperone protein
磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070)
組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 Anti-PRMT5
泛素蛋白連接酶U抗體 Anti-UBE2U
膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgG H&L
羊乳腺上皮細(xì)胞DNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗體 Anti-SKAR
APC標(biāo)記的小鼠抗牛IgG H&L
Mouse Anti-Bovine IgG H&L / APC
溶質(zhì)載體家族24成員4抗體
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。