組織來源 |
頸動脈組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞分類 |
豬原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭形細(xì)胞 |
細(xì)胞簡介:
頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。血管發(fā)生一個主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。因此,對動脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常頸動脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細(xì)胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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磷酸化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 Anti-Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870)
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豬頸動脈平滑肌細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接蛋白1抗體 Anti-STAM
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Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy7
溶質(zhì)載體家族25成員48抗體